GST标签蛋白（谷胱甘肽S-转移酶标签蛋白）是一种广泛用于分子生物学中的融合蛋白标签。GST是一种催化药物代谢的酶，能够与谷胱甘肽（GSH）结合。通过在目标蛋白质上附加GST标签，可以方便地纯化目标蛋白，并进一步分析其功能和性质。
GST标签的优势：
1.提高蛋白表达：有助于蛋白质的表达，因为GST本身能稳定目标蛋白，减少其在细胞内的降解。
2.高亲和力结合：GST与谷胱甘肽的结合具有非常强的亲和力，这使得GST标签在目标蛋白纯化中非常有效。
GST标签在蛋白纯化中的应用：
1.融合表达：通过基因工程技术，将目标蛋白的基因与GST基因融合，在表达系统（如大肠杆菌）中表达。
2.蛋白质提取：从表达系统中提取细胞裂解液。
3.亲和层析：将裂解液通过包含谷胱甘肽的亲和柱，GST标签会与谷胱甘肽结合，从而使目标蛋白被富集。
4.洗脱：通过使用过量的游离谷胱甘肽或改变盐浓度洗脱目标蛋白。
1.蛋白互作研究：通过将其与其他可能的互作蛋白一起表达，可以通过GSTpull-down实验研究蛋白间的相互作用。
2.抗体生成：GST融合蛋白也可用于抗体的制备，因为GST本身是一个高免疫原性的蛋白，能够激活免疫系统。
3.蛋白定位和功能分析：研究人员可以追踪目标蛋白在细胞内的位置和动态变化，进而分析其功能。
GST标签蛋白的改进与变种：
虽然GST标签是一种非常有用的工具，但也存在一些限制。例如，GST标签可能会影响目标蛋白的折叠、活性或稳定性。因此，研究人员开发了许多不同的变种，以提高效率或减小对目标蛋白的干扰。
1.GST-fusion蛋白变种：包括双标签系统（如GST与His标签的组合），这种系统可以进一步提高纯化效率，或改善对某些蛋白的亲和性。
2.清洗和去除标签：通过使用特定的酶（如HRV3C蛋白酶、PreScission蛋白酶）切割GST标签，使得研究人员能够去除GST标签后得到纯净的目标蛋白。
更新时间：2025-08-18
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