GST标签蛋白(谷胱甘肽-S转移酶标签蛋白)是一种广泛应用于分子生物学中的融合标签,用于重组蛋白的表达、纯化和鉴定。GST(GlutathioneS-transferase)本身是一种具有酶活性的蛋白质,能够结合谷胱甘肽,并在多种生物体内参与解毒反应。将GST与目标蛋白融合后,能够通过其亲和力与谷胱甘肽结合,简化蛋白的纯化过程,广泛应用于蛋白表达与纯化系统中。
GST标签蛋白通常由两个部分组成:目标蛋白和GST融合标签。GST作为标签,通常具有较高的亲和力与谷胱甘肽结合,能够将融合蛋白特异性地吸附到含有谷胱甘肽的亲和树脂上。目标蛋白与GST标签融合后,可以通过亲和层析法从复杂的蛋白混合物中纯化出来。 这种系统的一个优势是GST标签不仅有助于纯化,还能帮助目标蛋白在表达系统中的稳定性。通过这种方式,即使目标蛋白较难表达或容易降解,GST标签仍能提供一定的保护作用,保证目标蛋白的高产量和活性。

应用:
1.蛋白表达与纯化
在蛋白质工程和生物化学研究中,GST标签常用于重组蛋白的表达与纯化。通常通过基因工程技术将GST基因与目标蛋白的基因融合,并在大肠杆菌或酵母中进行表达。之后,利用谷胱甘肽亲和层析法对融合蛋白进行纯化。这种方法简单、高效,是实验室常用的蛋白纯化技术。
2.蛋白相互作用研究
由于GST标签具有较强的亲和力,GST融合蛋白可以用来研究目标蛋白与其他蛋白的相互作用。通过与谷胱甘肽标记的亲和树脂结合,可以将目标蛋白及其结合的蛋白一起从细胞裂解液中分离出来,从而进行进一步的相互作用分析。
3.免疫学研究
由于本身具有免疫原性,因此在免疫学中常用于抗体的产生和分析。通过注射GST融合蛋白,能够诱导宿主产生特异性的抗GST抗体,这对研究蛋白质的表达、定位及功能具有重要意义。
GST标签蛋白的优点:
1.高效纯化:可通过简单的亲和层析方法高效纯化目标蛋白。
2.提高稳定性:有助于提高目标蛋白的稳定性,避免其在表达过程中降解。
3.应用广泛:适用于多种表达系统(如大肠杆菌、昆虫细胞和哺乳动物细胞)。