是通过大肠杆菌（E. coli）系统重组表达的高纯度BsaⅠ限制性内切酶。BsaⅠ是一种IIs型限制性内切酶，能够识别非回文序列并在识别位点外侧进行切割，产生特定的粘性末端。这一特性使其成为金门克隆（Golden Gate Assembly） 和线性化DNA片段制备的关键工具酶，广泛应用于分子克隆、合成生物学及质粒构建等领域。

品名： BsaⅠ限制性内切酶

货号： UA070035

产品描述
本产品是通过大肠杆菌（E. coli）系统重组表达的高纯度BsaⅠ限制性内切酶。BsaⅠ是一种IIs型限制性内切酶，能够识别非回文序列并在识别位点外侧进行切割，产生特定的粘性末端。这一特性使其成为金门克隆（Golden Gate Assembly） 和线性化DNA片段制备的关键工具酶，广泛应用于分子克隆、合成生物学及质粒构建等领域。

产品特性

• 酶种类： IIs型限制性内切酶

• 来源： 嗜热脂肪芽孢杆菌（重组表达）

• 表达系统： 大肠杆菌（E. coli）表达系统

• 标签： His标签

• 分子量： 64.9 kDa（还原条件）

• 纯度： >95%（SDS-PAGE验证）

• 酶活性： 20 U/μL

• 性状： 液体

• 储存缓冲液： 10 mM Tris-HCl, 300 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 500 µg/mL BSA, 50% 甘油（pH 7.4 @ 25°C）

• 反应缓冲液： 随酶提供10×反应缓冲液

识别位点与切割特性

• 识别序列： 5'-GGTCTC(N)1↓-3' / 3'-CCAGAG(N)5↑-5'

• 切割方式： 在识别序列外侧进行切割，产生4个碱基的粘性末端。

• 酶活定义： 在50 µL反应体系中，37℃条件下，1小时内wan全消化1 µg pXba DNA所需的酶量定义为1个活性单位（U）。

产品优势

• 金门克隆的核心工具： 其独特的切割特性使其成为实现高效、无缝的多片段DNA组装——金门克隆的首xuan酶。

• 高纯度与高活性： 酶活高达20 U/μL，纯度>95%，确保切割效率与特异性。

• 配套完整： 提供优化的10×反应缓冲液和详细的操作步骤，开盖即用，方便快捷。

• 活性验证： 产品页面提供使用pUC57质粒的酶切验证电泳图，证明其可wan全消化1 µg质粒DNA。

• 应用广泛： 除了金门克隆，也常用于质粒线性化、制备特定粘性末端的DNA片段。

应用

• 金门克隆（Golden Gate Assembly）与多片段DNA组装

• 质粒DNA的酶切线性化

• 为DNA片段制备特定的粘性末端

• 合成生物学与基因回路构建

• 常规分子克隆实验

使用说明

1. 反应体系配置（以消化1 µg质粒DNA为例）：

• 质粒 DNA: 1 µg

• 10×反应缓冲液: 5 µL

• BsaⅠ（20 U/µL）: 1 µL

• 无核酸酶ddH₂O: 补足至50 µL

2. 反应条件： 37℃孵育 1小时。

3. 失活/纯化： 反应完成后，可通过热失活（65℃, 20分钟）或使用DNA纯化试剂盒进行纯化以进行后续实验。

4. 储存： 本品为液体酶，请于-25 ~ -15°C保存，在此条件下可稳定保存2年。

注意事项

1. 避免星号活性： 反应体系中甘油的终浓度不应超过5%，否则可能诱发星号活性（非特异性切割）。使用本产品时，请注意控制加入的酶体积。

2. 避免反复冻融： 请根据实验用量进行分装，并严格避免反复冻融，以保持酶活性。

3. 操作环境： 建议在无菌、无核酸酶的环境中进行操作。

保存条件
请置于-25 ~ -15°C冰箱中保存，避免反复冻融。

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