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产品型号:UA070001
更新时间:2025-11-25
厂商性质:生产厂家
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产品名称:牛源 Enterokinase, Light Chain
产品货号:UA070001
产品描述
牛源 Enterokinase, Light Chain是从牛肠中纯化得到的肠激酶轻链(Enterokinase, Light Chain)。肠激酶是一种高度特异性的丝氨suan蛋白酶,能识别并切割序列 (Asp)4-Lys↓,并在 Lys 的 C 末端进行切割。该轻链保留了完整的酶活性,但分子量更小,背景切割活性更低,广泛应用于重组蛋白的纯化过程中,用于去除 N 端的融合标签(如 GST、MBP、SUMO 等),以释放天然的目标蛋白。
产品特性
酶种类: 肠激酶轻链 (Enterokinase, Light Chain)
来源: 牛肠
识别序列: (Asp)4-Lys↓
切割位点: Lys↓ (P1-P1')
分子量: ~27 kDa (轻链)
纯度: ≥90%(SDS-PAGE验证)
储存缓冲液: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 10% Glycerol, pH 7.4
产品优势
高特异性: 特异性识别 (Asp)4-Lys 序列,非特异性切割活性极低。
高效切割: 对含有识别序列的融合蛋白具有高效的切割效率。
小分子量: 轻链形式分子量小,易于在切割后从反应体系中去除。
天然来源: 从牛肠中天然纯化,酶学性质稳定。
应用
重组蛋白的亲和标签去除(切割 (Asp)4-Lys 序列后的融合蛋白)
蛋白工程
体外蛋白切割与加工
使用说明
推荐反应条件:
反应缓冲液: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl₂, pH 7.4。(Ca²⁺对酶活至关重要)
酶与底物比例: 通常建议使用 1-2 单位 EK 酶切割 100 μg 底物蛋白。1 单位是指在 37°C、24 小时内切割 1 mg 测试底物达 95% 以上的酶量。
反应温度与时间: 22-25°C 反应 16-24 小时,或 4°C 过夜。
失活条件: 可通过加入 1-5 mM PMSF 或通过后续纯化步骤去除。
注意事项: 反应体系中应避免含有 EDTA 或 EGTA 等螯合剂,以免络合 Ca²⁺ 影响酶活。建议小规模测试以确定最佳反应条件。
保存条件
于-20℃条件下保存。在推荐的储存条件下可保持活性稳定至少 24 个月。避免反复冻融。
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