内切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶 H (Endo H)为通过大肠杆菌表达系统重组表达的内切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶H，带有His标签。Endo H是一种糖苷水解酶，能特异性切割天冬酰胺（Asn）连接的糖蛋白中高甘露糖型和部分杂合型寡糖链的壳二糖核心，但不能切割复杂型寡糖。

产品名称：内切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶 H (Endo H)

产品货号：UA070040

产品描述

本产品为通过大肠杆菌表达系统重组表达的内切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶H，带有His标签。Endo H是一种糖苷水解酶，能特异性切割天冬酰胺（Asn）连接的糖蛋白中高甘露糖型和部分杂合型寡糖链的壳二糖核心，但不能切割复杂型寡糖。该酶是研究糖蛋白糖基化修饰、分析糖链类型与结构的核心工具，常用于确定糖蛋白的糖基化类型、分析蛋白质折叠与运输，以及制备去糖基化蛋白样品。

产品特性

• 蛋白形式： 重组内切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶H，带有His标签

• 来源： 来源于 链霉菌 (Streptomyces plicatus)

• 表达系统： 大肠杆菌表达系统

• 活性： 500 U/μL

• 纯度： >95%（经SDS-PAGE及HPLC验证）

• 分子量： 30 kDa（还原条件下）

• 性状： 液体

• 缓冲体系： 20 mM Tris-HCl、50 mM NaCl、5 mM EDTA (pH 7.5 @ 25°C)

• 产品组分：

• 储存液： 500 U/μL Endo H、20 mM Tris-HCl、50 mM NaCl、5 mM EDTA (pH 7.5 @ 25°C)

• 10*变性缓冲液： 5% SDS、400 mM DTT

• 10*反应缓冲液： 500 mM 醋酸钠 (pH 6.0 @ 25°C)

产品优势

• 高比活性与高纯度： 活性高达500 U/μL，经SDS-PAGE和体积排阻色谱双重验证，纯度>95%，确保高效、特异的酶切效果。

• 操作方案成熟： 提供经过优化的详细操作步骤、专用变性及反应缓冲液，实验流程标准化，结果可靠。

• 质量数据详实： 提供明确的酶活定义和生物活性验证电泳图，数据支持充分。

• 应用广泛： 是糖蛋白组学、蛋白质分泌与折叠机制、抗体工程等领域的关键研究工具。

应用方向

• 分析糖蛋白的N-连接糖链类型（高甘露糖型/杂合型 vs. 复杂型）

• 研究糖基化对蛋白质折叠、稳定性、分泌及功能的影响

• 在Western Blot或质谱分析前，简化糖蛋白的条带或谱图

• 制备去糖基化的蛋白质样品，用于结构或功能研究

• 抗体等重组糖蛋白的质量控制

使用说明（以处理1-20 μg糖蛋白为例）

1. 变性： 将1-20 μg糖蛋白与1 μl 10*变性缓冲液混合，用无菌水补足至10 μl。100°C加热变性10分钟。

2. 配置反应体系： 向上一步变性后的样品中依次加入：

• 2 μl 10*反应缓冲液

• 1-5 μl Endo H (根据实验需求调整酶量)

• 用无菌水补足至总体积20 μl

3. 酶切反应： 轻轻混匀，置于37°C温育1小时。

注意事项

• 底物特异性： Endo H仅切割高甘露糖型和部分杂合型N-糖链，对复杂型N-糖链无活性。实验前请确认目标糖蛋白的糖型。

• 样品变性： 为确保酶切效率，糖蛋白样品必须进行热变性处理。

• 保存： 请避免反复冻融，建议分装使用。

• 阴性对照： 建议设置不加酶的样品作为对照，以观察糖蛋白本身的电泳迁移位置。

保存条件

本品为液体形式，请于-25 ~ -15°C条件下保存，自收货之日起保质期为2年。

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