本产品为通过大肠杆菌重组表达并纯化的肽N-糖苷酶F，带有His标签。PNGase F是一种高效、特异的酰胺水解酶，能催化绝大多数N-连接糖链在天冬酰胺残基处的wan全切除，是糖蛋白结构解析、蛋白质组学、抗体工程及生物药质量分析中的核心工具酶。本品以高浓度液体形式提供，并配套包含变性缓冲液、反应缓冲液和去垢剂的完整去糖基化试剂盒，满足不同条件下的实验需求。

产品名称： PNGase F
产品货号： UA070014

产品描述
本产品为通过大肠杆菌重组表达并纯化的肽N-糖苷酶F，带有His标签。PNGase F是一种高效、特异的酰胺水解酶，能催化绝大多数N-连接糖链在天冬酰胺残基处的wan全切除，是糖蛋白结构解析、蛋白质组学、抗体工程及生物药质量分析中的核心工具酶。本品以高浓度液体形式提供，并配套包含变性缓冲液、反应缓冲液和去垢剂的完整去糖基化试剂盒，满足不同条件下的实验需求。

产品特性

• 酶形式： 重组肽N-糖苷酶F

• 来源： 脑膜脓毒性伊丽莎白菌

• 表达宿主： 大肠杆菌

• 标签： His 标签

• 纯度： >95%（SDS-PAGE验证）

• 比活性： 100，000 U/mL

• 性状： 液体（50%甘油储存液）

产品优势

• 超高比活性：活性高达100，000 U/mL，使用微量即可实现高效、che底的去糖基化。

• 底物谱广泛：可切割高甘露糖型、杂合型和复杂型在内的绝大多数N-连接聚糖（核心α1-3岩藻糖修饰的除外）。

• 提供完整试剂盒：产品包含PNGase F酶、10×反应缓冲液、10×变性缓冲液和10× NP-40，提供完整解决方案。

• 操作方案灵活：提供针对变性蛋白（1小时快速反应）和非变性蛋白（4-24小时温和反应）两种详细、优化的操作流程。

• 应用成熟可靠：是糖蛋白研究的金标准酶，在抗体表征、生物标志物发现和生物制药开发中应用广泛。

应用

• 糖蛋白（尤其是抗体类药物）的去糖基化处理，用于SDS-PAGE迁移率分析或质谱分析。

• 蛋白质组学研究中，去除糖链以提高酶解效率和肽段鉴定率。

• 研究糖基化对蛋白结构、功能及稳定性的影响。

• 生物制药工艺中，分析治疗性蛋白的糖型。

• 作为工具酶用于糖生物学相关机制研究。

使用说明

• 酶活定义：1个活性单位（U）指在37°C下，10 μL反应体系中，1小时内能从10 μg变性RNase B上切除>95%糖链所需的酶量。

• 快速去糖基化（推荐用于变性蛋白）：

1. 取1-20 μg糖蛋白，加入1 μL 10×变性缓冲液，补水至10 μL，100°C加热变性10-20分钟。

2. 冷却后，加入2 μL 10×反应缓冲液、2 μL 10% NP-40和5 μL水，混匀。

3. 加入1 μL PNGase F，37°C孵育1小时。

4. 进行SDS-PAGE或其他分析。

• 非变性去糖基化（用于天然蛋白）：将1-20 μg糖蛋白与2 μL 10×反应缓冲液、2-5 μL PNGase F及补水至20 μL混合，37°C孵育4-24小时。

• 储存：请于-20°C至-70°C保存，避免反复冻融。产品含50%甘油，-20°C不冻结。

• 关键注意事项：避免使用含SDS的缓冲液，因其会抑制酶活。对于含有核心α1-3岩藻糖的稀有糖型无效。

保存条件
自收货之日起，于-20°C至-70°C条件下，可稳定保存12个月。

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